= structure constante la plus externe de toute bactérie

• enveloppe la membrane cytoplasmique qui recouvre le cytoplasme
• s'impose entre la bactérie et le milieu extérieur

-> dans la paroi = peptidoglycane = molécule n'existe que chez les bactéries

• ne peuvent pas vivre sans = cible idéal (pour les ATB par exemple)
• = peu ou pas de toxicité chez l'homme (pas présente chez les eucaryotes)

Intérêts

-> connaissance du type pour permettre de relever une erreur sur ordo

Mise en évidence de son individualité anatomique

-> 3 méthodes spécifiques

• coloration spécifique de la paroi
• fixation d'anticorps dirigés spécifiquement vers un élément de la paroi
• observation des bactéries plasmolysées au microscope

Comparaison GRAM + et GRAM -

Différences de paroi

-> GRAM + = plus grosse couche de peptidoglycane

-> GRAM - = 2 membranes

• membranes externes : LPS = endotoxines
• entre les 2 membranes : couche de peptidoglycane beaucoup moins épaisse
• accroché à la fois à la membrane cytoplasmique et externe par une lipoprotéine

= pas seulement un différence de coloration

• GRAM + molécules peuvent + facilement passer contrairement aux GRAM -
• GRAM + peuvent diffuser beaucoup plus facilement des toxines

Coloration de GRAM

-> première étape de coloration : violet de gentiane = colore toutes les bactéries en violet

-> étape de traitement au lugol (mordant) = stabilise la coloration

-> décoloration = lavage avec de l'alcool : qui passe dans la paroi des GRAM - = enlève la coloration

• GRAM + : l'alcool n'enlève pas la coloration violette

-> contre-coloration à la fuchsine = GRAM - deviennent rose

= GRAM + colorent mais ne décolorent pas

= GRAM - colorent mais décolorent à l'alcool

Peptidoglycane

= macro-molécule

-> composée :

• d'une partie sucré
• NAG = partie glucidique
• ANAM = acide muramique
• = tétrapeptides sont attachés les uns aux autres par des ponts interpeptidiques
• et partie une protéique

-> GRAM +

• grande quantité d'acides téichoïques = un peu partout dans la molécule
• acide lipotéchoïque = permet de s'accrocher à la membrane cytoplasmique - connectés aux lipides de la membrane plasmique jusqu'à atteindre la surface avec charge négative
• = permet de maintenir le "grillage"

-> bactérie en synthétise en permanence

• autolyse = en détruit et en reconstruit pour qu'il soit parfait

-> épaisseur inconstante et plus épaisse si bactérie âgée

• pas d'isolement de structure par cryodécapage
• point de contact entre le membrane cytoplasmique et la paroi
• espace périplasmique plus large

-> si des ATB bloquent les synthèses protéiques = épaisseur de la paroi augmente

-> GRAM -

• paroi plus complexe :
• membrane externe
• lipoprotéine de Braun : très lié au peptidoglycane ainsi membrane externe et peptidoglycane forme 1 entité
• lipopolysaccharides = LPS en 3 parties
• lipide A
• polysaccharide central
• chaîne latéral O
• contribue à la charge négative de la surface de la bactérie
• lipide A souvent toxique

-> barrière de protection = empêche ou diminue l’entrée de sels biliaires, d'ATB et autres tout en permettant le passage de petites molécules (glucose ou monosaccharide) grâce aux porines

• porines = assemblage de 3 porines traversant membrane et formant canaux

• fine couche de peptidoglycane

-> GRAM - = + de lipides car + 2 membranes

-> GRAM + = + d'osamines car + grosse couche de peptidoglycane

Paroi des bactéries

-> GRAM + = paroi + membrane plasmique

-> GRAM - = membrane plasmique + externe + paroi très fine

-> épaisseur et simplicité relative de la paroi des bactéries à GRAM + avec l'acide téichoïque

-> différence d'organisation est très importante pour l'orientation du pouvoir pathogène

• bactérie à G- : peu perméables = produits diffusent lentement vers l'extérieur
• bactéries à G+ : diffusion facilitée = liaison avec le pouvoir pathogène

Espace périplasmique

= entre la membrane externe de la paroi et la membrane cytoplasmique

• espace péri-cellulaire à virtuel

= zone relativement riche

-> important chez les bactéries Gram-

-> complexe chez les bactéries à Gram+

• ponts et filaments à certains endroits : acides téichoïques et téichuroniques = incrustent le peptidoglycane et la membrane cytoplasmique

-> transports de précurseurs du cytoplasme vers paroi

Peptidoglycane

-> abondance chez les Gram +

-> structure sur un motif de base en trois parties constitué

• d'une hétéropolysaccharides (NAG-ANAM)
• d'un trétrapeptide latéral
• de ponts interpeptidiques

-> la bactérie peut rallonger ou raccourcir le peptidoglycane

-> synthèse

• assemblage des précurseurs dans le cytoplasme
• transport à travers la membrane cytoplasmique
• polymérisation

Acides téichoïques

-> polymères secondaires de la paroi

-> macromolécules spécifiques des bactéries à Gram +

• donnent à la bordure extérieure de la paroi un aspect crénelé

-> permet le maintien du peptidoglycane

-> extractibles avec la paroi

• non associés à des lipides
• associées au peptidoglycnae
• = acides téichoïques pariétaux

-> ancrés dans la membrane cytoplasmique

• non extractibles avec la paroi isolée
• acides téichoïques membranaires
• = acide lipotéichoïques

-> variétés d'acides téichoïques

Les lipopolysaccharides

-> constituants spécifiques de la couche externe de la paroi

= présence exclusive chez les bactéries à Gram -

-> entraîne une forte réponse immunitaire

-> dans la structure :

• lipide A - encrée dans la membrane externe
• core interne - qui fait la liaison
• antigène O

-> variation de structure

• partie lipidique variable d'un genre à l'autre
• partie sucrée très variable au sein d'un genre

-> antigène commun aux entérobactéries

• entérobactéries = Gram- au niveau de l'intestin

Protéines de membrane

-> très importante chez les Gram-

-> certaines d'entres elles sont inductibles

• lamB = protéine qui forme un canal de diffusion pour le maltose

-> certaines majoritaires et importantes

• lipoprotéine de BRAUN
• porines
• OmpA d'E.coli

-> bactérie peut se passer des lipoprotéines mais résistera moins bien au froid, au chaud, au stress...

Protéines du périplasme

-> protéines libres avec activité enzymatique

-> essentiellement de dégradation

-> enzymes de restriction = endonucléases

-> beaucoup d'activités dans le périplasme

• synthèse des PG
• transport et modification de protéines
• résistance antibiotiques