Hydrolyse acide de l'amidon :
Dès 18 minutes l'hydrolyse de l'amidon commence: un sucre réducteur simple apparaît (glucose: glucotest positif). A 21 minutes, tout l'amidon a disparu. L'hydrolyse est totale donc terminée.
Hydrolyse enzymatique de l'amidon
Dès 6 minutes l'hydrolyse de l'amidon est totale donc terminée. Le glucotest est positif ce qui traduit la présence du sucre réducteur : glucose. L'absence d'enzyme (T3) n'a pas permis l'hydrolyse
Conclusion: Le rôle de l'enzyme est d'accélérer une réaction à des températures compatibles avec la vie. Elles permettent l'hydrolyse des molécules complexes, donc la simplification moléculaire.
La synthèse d'amidon s'est produite que dans le tube T2.
Dans les autres tubes, il manquait soit l'enzyme soit le glucose.
Conclusion: Les enzymes (amidon synthase) contenue dans les cellules de pomme de terre permettent la polymérisation de molécules de glucose pour former de l'amidon.
Bilan général :
Le rôle des enzymes est de catalyser (d'accélérer) les réactions chimiques chez les EV.
Les enzymes présentent une spécificité d'action:
- certaines enzymes catalysent les réactions d'hydrolyse: ce sont des hydrolases.
- certaines enzymes catalysent les réactions de polymérisation: ce sont des polymérases.
identifier l’origine de ce dysfonctionnement de l’amylase salivaire
On sait que certains acides aminés du site actif sont indispensables au fonctionnement de l’enzyme :
• acides aminés impliqués dans l’hydrolyse de l’amidon : Asp197, Glu233, Asp300
• acides aminés impliqués dans la liaison au substrat : Trp58, Trp59, Tyr62
Substitution de l’alanine 197 par asparagine 197 => modification d’un des acides, aminés impliqué dans l’hydrolyse de l’amidon = problème au niveau du site catalytique dans le mécanisme d’hydrolyse
amylase salivaire fonctionnelle PRO versus amylase salivaire non fonctionnelle PRO
Anomalie en position 58 de la chaîne peptidique = Remplacement d’un tryptophane (Trp) par une alanine (Ala)
Le reste des acides aminés est identique entre les deux molécules.
Or le Trp58 est un acide aminé impliqué dans la liaison au substrat donc le substrat ne peut se lier à l’amylase = modification de la configuration 3D de la protéine au niveau de son site catalytique = dysfonctionnement de l’amylase salivaire
La carboxypeptidase (CPA) est une enzyme protéique, produite par le pancréas et impliquée dans la digestion des protéines. Son substrat est un dipeptide, molécule constituée de deux acides aminés. Cette enzyme catalyse l’hydrolyse de ce dipeptide pour donner deux acides aminés libres.
Certains individus ont une CPA inactive ne parvenant pas à fixer ou à catalyser la transformation du substrat.
On cherche, par une étude moléculaire de l’enzyme, à déterminer l’origine de cette inactivité.